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细细分辨乙肝病毒标志物

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日期:2006-12-12 来源:景天阁·健康资讯
内容提示:临床工作中发现少部分经酶联免疫吸附法(elisa)检测仅乙型肝炎表面抗原(hbsag)和抗-hbcigg阳性的患者,病毒含量却很高。为此,采用时间分辨免疫荧光分析法(trf)对34例此类患者进行乙型肝炎标志物(hbvm)的检查,现将结果报道如下。采静脉血分离血清,用elisa进行hbv标志物(hbvm)检测及hbvdna定量检查。(1)hb...

临床工作中发现少部分经酶联免疫吸附法(elisa)检测仅乙型肝炎表面抗原(hbsag)和抗-hbcigg阳性的患者,病毒含量却很高。为此,采用时间分辨免疫荧光分析法(trf)对34例此类患者进行乙型肝炎标志物(hbvm)的检查,现将结果报道如下。

一、资料与方法

1.病例选择:为2002年2月至9月住院或门诊患者,共34例,男21例,女13例,年龄5~58岁,平均(29.2±18.7)岁。采静脉血分离血清,用elisa进行hbv标志物(hbvm)检测及hbvdna定量检查。留取血清置-30℃保存。(1)hbsag、抗-hbcigg阳性,乙型肝炎e抗原(hbeag)、抗-hbs、抗-hbe、抗-hbcigm阴性;(2)hbvdna含量>104拷贝/ml;(3)近3个月未使用抗病毒药物。每人进行2次抗原抗体检查,结果一致。2次hbvdna检查,结果相差1个数量级以下。

2.常规hbvm检测:用elisa法,试剂为上海科华生物工程股份有限公司产品,按产品说明书操作。

3.hbvdna含量测定:采用实时荧光定量pcr法,试剂盒购自广州中山医科大学达安基因诊断中心。仪器为美国perkinelmer公司geneamp甈e5700型pcr仪。严格按说明书操作,检测灵敏度为103拷贝/ml。

4.trf法检查hbvm:试剂为上海新波生物技术有限公司产品,采用anytest2000时间分辨检测仪。严格按照产品说明书操作。

5.统计分析:取hbvdna含量的对数值进行成组设计的两样本均数比较,行t检验。

二、结果

1.hbvm:用trf法检查发现,34例患者中hbsag、hbeag、抗-hbc均阳性者15例,hbsag、抗-hbe、抗-hbc均阳性者14例,仅hbsag、抗-hbc阳性者5例。即用elisa检查时hbeag假阴性15例,抗-hbe假阴性14例(表1)。

表1时间分辨免疫荧光发析法检测乙型肝炎标志物结果(x-±s)

乙型肝炎标志物参考值样本数浓度阳性例数阳性率(%)

乙型肝炎表面抗原0~0.5ng/ml34279.19±61.6234100.0

乙型肝炎表面抗体0~10mu/ml342.21±5.6000

乙型肝炎e抗原0~0.03ncu/ml340.15±0.131544.1

乙型肝炎e抗体0~1.5ncu/ml342.86±1.291441.2

乙型肝炎c抗体0~0.1ncu/ml3411.83±4.7934100.0

2.hbvdna含量:hbeag及抗-hbc均阴性组、hbeag阳性组、抗-hbc阳性组hbvdna含量的对数平均值分别为6.45±1.74、7.29±1.59、5.80±1.46。将前者与后两组分别进行成组设计的两样本均数比较的t检验,t值分别为1.005、0.816,p值均>0.05,差异无显著性。

三、讨论

hbvm的变化是评估hbv感染后病情转归的重要依据,也是抗病毒治疗的疗效考核指标之一。通过trf检查发现,大部分elisa法检测为hbsag、抗-hbc阳性模式的患者其实为hbeag假阴性(15/34,44.12%)及抗-hbe假阴性(14/34,41.18%)。仅少部分可能为病毒变异的结果。研究发现,hbsag、抗-hbc浓度显著高于正常,elisa及trf符合率为100%,抗-hbs浓度明显低于正常,两者符合率为100%。而hbeag、抗-hbe浓度仅稍高于正常,因此elisa易出现假阴性。目前trf主要用于激素的检测。随着仪器及试剂的国产化,检测费用的降低,trf因其突出的高敏感性、特异性强、无放射污染等特点,在hbvm的检测中有着广泛的应用前景。

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