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骨髓间充质干细胞来源类肝细胞的功能和超微结构评估

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日期:2006-11-30 来源:景天阁·健康资讯
内容提示:372-376(重庆)为了对骨髓间充质干细胞(MMSCs)来源的类肝细胞进行功能和超微结构评估,研究者从人胎儿骨髓中分离MMSCs,在1%基质胶(Matrigel)作基质,2。5μmol/ml氮胞苷(AZA)预处理10~12h,肝细胞生长因子(HGF)10ng/ml+成纤...

2005年05月18日中华传染病杂志2004Vol.22No.6p.372-376 (重庆)为了对骨髓间充质干细胞(MMSCs)来源的类肝细胞进行功能和超微结构评估,研究者从人胎儿骨髓中分离MMSCs,在1%基质胶(Matrigel)作基质,2.5μmol/ml氮胞苷(AZA)预处理10~12h,肝细胞生长因子(HGF)10ng/ml+成纤维细胞生长因子4(FGF4)10ng/ml+肝细胞生长培养基(HGM)中培养和诱导。以未诱导的MMSCs作对照,对诱导4d、7d、14d、21d、28dMMSCs采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液中人白蛋白(ALB)水平,脲酶法检测合成尿素的能力,过碘酸希夫试验进行糖原染色,电镜观察细胞超微结构。结果在分化过程的不同时相点检测ALB和尿素生成,未诱导分化的MMSCs没有分泌ALB和产生尿素,而给予FGF4和HGF处理后,MMSCs以时间依赖方式产生ALB和尿素。用过碘酸希夫(pAS)染色法分析发现MMSCs诱导14d时首先见到部分细胞出现红紫色染色的糖原积聚物,28d后阳性染色细胞数量增多,提示诱导后MMSCs已具备肝细胞的糖原合成能力。电镜显示未诱导MMSCs具有幼稚细胞的结构特点。诱导28d的MM-SCs已分化,并具有上皮样细胞的极性结构特点。可见诱导后MMSCs已具备肝细胞特有的结构和功能性特征。

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