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沙眼衣原体主要外膜蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定

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日期:2006-11-30 来源:景天阁·健康资讯
内容提示:709-711(湖南)为克隆沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因,构建原核表达重组载体,并通过E。coliBL21实现MOMP的融合表达,研究者用PCR法扩增MOMP基因,克隆插入到pUCm-T载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到原核表达载体pET-22...

2005年04月22日中华皮肤科杂志2004Vol.37No.12p.709-711 (湖南)为克隆沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMp)基因,构建原核表达重组载体,并通过E.coliBL21实现MOMp的融合表达,研究者用pCR法扩增MOMp基因,克隆插入到pUCm-T载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到原核表达载体pET-22b(+)中,采用Ni-NTA亲和层析法纯化表达产物,对表达产物进行SDS-pAGE和蛋白质印迹鉴定。结果pCR扩增出约1200bpDNA片段,序列测定证实与基因库登陆的D型沙眼衣原体一致;表达产物的相对分子质量为47000,与预期分子质量相符,蛋白印迹证实表达产物为特异性蛋白。可见沙眼衣原体MOMp基因可以在大肠杆菌中得到表达,其表达产物能与相应的抗体结合,为沙眼衣原体核酸疫苗的研究奠定了基础。

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