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前列腺特异性膜抗原启动子增强子调控重组质粒的构建及鉴定

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日期:2006-11-22 来源:景天阁·健康资讯
内容提示:371-37410(成都)为了探讨前列腺特异性膜抗原(PSMA)启动子和增强子调控目的基因表达的前列腺细胞特异性,了解增强子增强转录效率的能力。研究者采用PCR方法从前列腺癌细胞DNA中分别..

2005年12月28日中华泌尿外科杂志2005Vol.26No.6p.371-37410 (成都)为了探讨前列腺特异性膜抗原(pSMA)启动子和增强子调控目的基因表达的前列腺细胞特异性,了解增强子增强转录效率的能力。研究者采用pCR方法从前列腺癌细胞DNA中分别扩增pSMA启动子和增强子序列,先后克隆到含有报告基因绿色荧光蛋白(GFp)的质粒载体,脂质体介导基因转染不同癌细胞并观察GFp在不同细胞的表达情况。结果成功构建质粒pEGFp-pS-MApro和pEGFp-pSMAEp,转染结果显示pSMA表达阳性的LNCap细胞中存在GFp的有效表达,且pEGFp-pSMAEp的调控转录能力较pEGFp-pSMApro强20倍。可见pSMA启动子增强子调控GFp表达的重组质粒的构建证明该调控序列具有前列腺细胞特异性,增强子能够明显增强启动子的转录效率,增加了目的基因的表达水平。pSMA启动子和增强子的共调控可以保证基因表达的强度和细胞特异性,为前列腺癌基因靶向性治疗研究提供实验依据。

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