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人肋软骨细胞体外培养中生长代谢及功能的变化

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日期:2006-11-22 来源:景天阁·健康资讯
内容提示:372-3766(上海)为了通过检测体外培养的人肋软骨细胞老化过程中Ⅰ、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖(aggrecan)的表达变化,为组织工程软骨构建的种子细胞选择适宜的回植时机,研究者取体外培养的...

2005年06月09日中华整形外科杂志2004Vol.20No.5p.372-3766 (上海)为了通过检测体外培养的人肋软骨细胞老化过程中Ⅰ、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖(aggrecan)的表达变化,为组织工程软骨构建的种子细胞选择适宜的回植时机,研究者取体外培养的p1~p5人肋软骨细胞,通过观察细胞形态,细胞增殖率,Alcianblue法定量检测每代Aggrecan中GAG含量,免疫组化蛋白水平观察Ⅰ、Ⅱ型胶原表达及RT-pCR从mRNA水平分析Ⅰ、Ⅱ型胶原及Aggrecan基因表达量。结果人肋软骨细胞从第3代起逐渐向成纤维样细胞形态转换;每代软骨细胞Aggrecan中GAG含量随传代次数逐渐降低,第3代后处于较低水平;Ⅰ、Ⅱ型胶原的表达在蛋白水平及mRNA水平基本一致,第2代以前Ⅱ型胶原表达较强,Ⅰ型胶原表达较弱;之后随传代Ⅱ型胶原表达减弱,Ⅰ型胶原表达逐渐增强;而Aggrecan在第3代以前表达较高,从第4代后明显下降。可见人软骨细胞体外培养老化过程中综合细胞扩增及细胞功能因素,第2代的软骨细胞(体外扩增约18.326倍)可作为构建人组织工程软骨的种子细胞。

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