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裸鼠人大肠癌移植模型的建立

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日期:2006-11-22 来源:景天阁·健康资讯
内容提示:裸鼠是建立肿瘤模型的良好动物品系,以往大多是用能传代培养的大肠癌细胞株建立的人大肠癌裸鼠模型,本研究采用病人的肿瘤组织建立了三组人大肠癌裸鼠移植模型。大肠癌组织来源及移植方法本研究建立了三组大肠癌模型,共有三个来源。初代移植:严格无菌条件下取得癌块后剪成直径约1。5mm的小块,30分钟内接种于裸鼠颈部皮..

裸鼠是建立肿瘤模型的良好动物品系,以往大多是用能传代培养的大肠癌细胞株建立的人大肠癌裸鼠模型,本研究采用病人的肿瘤组织建立了三组人大肠癌裸鼠移植模型。

材料和方法

一.动物BALB/C(nu/nu)裸小鼠购自中国科学院上海实验动物研究所,SpF级,鼠龄4~8周,体重15~25克,雌雄兼用,饲养于超净生物层流架内,环境定期紫外线消毒,保持恒温恒湿,笼具、饮水、垫料、饲料均经高压蒸气灭菌。实验操作均在无菌罩内进行。

二.大肠癌组织来源及移植方法

本研究建立了三组大肠癌模型,共有三个来源。A组:男性,36岁,升结肠低分化腺癌,DukesB期,CEA(+),ER(+);B组:男性,43岁,乙状结肠低分化腺癌,DukesC期,CEA(+),ER(+);C组:女性,33岁,乙状结肠腺癌II级,DukesC期,CEA(+),ER(-)。

初代移植:严格无菌条件下取得癌块后剪成直径约1.5mm的小块,30分钟内接种于裸鼠颈部皮下,每组接种三只。

传代移植:当皮下移植瘤长至直径约1.5cm左右时取出移植瘤,用自制切刻器,切取3mm×3mm×1.5mm瘤组织,直接切开皮肤接种于裸鼠颈部皮下作鼠间传代(每代2~3只)。

三、移植瘤生长情况及倍增时间

肿瘤植入后,定期观察肿瘤生长情况,定期用游标卡尺测量移植瘤的最大径(a)和最小径(b),按公式V=0.4×ab2折算瘤体积。倍增时间(Td)的计算:先计算生长率K=(LnNt-LnNO)/t(No为初始体积,Nt为t时间后瘤体积),然后按公式Td=Ln(2/k)计算倍增时间。

四、病理形态研究

取初代及每次传代的人大肠癌瘤块,用10%甲醛固定,进行常规光学显微镜病理组织学观察。

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