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细胞粘附分子在大肠癌中的表达及其临床意义

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日期:2006-11-22 来源:景天阁·健康资讯
内容提示:癌细胞与细胞外基质(ECM)之间的相互作用是肿瘤浸润和转移的一个重要环节,这种相互作用是由存在于细胞膜上的一大类细胞粘附分子(CAMs)来介导的。CAMs不仅参与调节正常细胞的生物学行为,而且对肿瘤细胞的浸润和转移有着重要的影响。根据免疫球蛋白超基因家族中的CD44分子结构上的特点,CAMs可分为五大类,即整合素、钙粘..

癌细胞与细胞外基质(ECM)之间的相互作用是肿瘤浸润和转移的一个重要环节,这种相互作用是由存在于细胞膜上的一大类细胞粘附分子(CAMs)来介导的。CAMs不仅参与调节正常细胞的生物学行为,而且对肿瘤细胞的浸润和转移有着重要的影响。根据免疫球蛋白超基因家族中的CD44分子结构上的特点,CAMs可分为五大类,即整合素、钙粘蛋白、免疫球蛋白超基因家族、选择蛋白和CD44分子等[2,3]。本文选择免疫球蛋白超基因家族中的CD44分子的标准型(CD44s)及其变异型CD44v6两种单抗,应用免疫组合的方法对20例正常大肠粘膜和82例大肠癌原发灶组织进行研究,探讨CAMs的表达与大肠癌浸润转移影响及各因素的内在联系。

1材料与方法

1.1材料:选自我院及协作单位1985年1月至1999年2月间大肠癌原发灶组织块共82例,均经病理诊断证实,其中高分化腺癌48例,低分化腺癌34例,20例正常大肠粘膜组织取自大肠癌患者距癌肿边缘10cm以上的正常大肠粘膜组织,各例均有完整的临床病理资料。CD44s、CD44v6单抗及免疫组化S-p试剂盒均购自北京中山生物技术公司。

1.2方法:组织切片脱蜡水洗,3%H2O2甲醇(试剂A)处理10min,蒸馏水洗3×2min,将切片放入柠檬酸盐缓冲液的容器中,置微波炉进行抗原修复10min,冷却后蒸馏水洗,pBS洗2次,每张切片滴非免疫性动物血清(试剂B),室温孵育10min,分别加CD44s(稀释度1∶100)、CD44v6(稀释度1∶50)抗体于4℃过夜。pSB洗3×10min,滴加生物素标记的第二抗体(试剂C),室温10min,pBS洗3×10min,滴加链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶溶液(试剂D),室温10min,pBS洗3×5min,AEC显色,苏木素复染,水溶性封片剂封片。设阳性对照及同时用pBD替代一抗作阴性对照。

1.3判断标准及统计学方法:根据细胞膜、细胞质的着色程度和范围作如下描述:(-)基本不着色或未见阳性细胞;(+)着色淡或着色细胞高于5%,但低于25%;()着色适中或着色细胞占25%~50%;()着色或着色细胞大于50%。所获半定量数据进行χ2检验和spearman等级相关分析。

2结果

2.1正常大肠粘膜组织,大肠腺癌组织CD44s和CD44v6的表达特征:CD44s在正常大肠粘膜上皮中有10%(2/20)微弱阳性表达,而间质纤维母细胞、平滑肌细胞呈强阳性表达,CD44v6在正常大肠粘膜组织及间质中均无表达。大肠癌中CD44s和CD44v6阳性率分别为91.4%(75/82)和65.8%(54/82),与正常大肠粘膜组织相比明显增加(p<0.01)。而且阳性物质在细胞膜上呈非均质性着色,明显丧失极性,CD44v6在低分化腺癌中细胞膜、细胞质表达呈强阳性。

2.2CD44s和CD44v6表达与大肠癌临床病理特征的关系(见表1):大肠腺癌CD44s的表达,与肿瘤大小、生长情况等无显著相关性(p均>0.05),两者的表达运用spearman等级相关分析表明显著相关(r=0.803,p<0.01)。CD44v6阳性率,浸润型显著高于膨胀型,分化差者显著高于分化好者,浸润浆膜层显著高于未穿透浆膜层,伴有淋巴结转移显著高于无淋巴结转移者(p<0.01)。

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