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大肠癌细胞p53基因突变与细胞凋亡及细胞倍性的关系

正文字体:  
日期:2006-11-22 来源:景天阁·健康资讯
内容提示:了解p53基因突变、细胞倍性、细胞凋亡三者的关系,探讨突变型p53基因在肿瘤发生中的作用机制。方法采用PCR-SSCP(单链构象多态性)检测p53基因突变,用流式细胞仪Facscan检测大肠癌细胞染色体倍性、凋亡率及其在细胞周期各相中的分布情况。结果大肠癌标本p53基因突变率为50%。其中突变组肿瘤细胞凋亡率(22。

了解p53基因突变、细胞倍性、细胞凋亡三者的关系,探讨突变型p53基因在肿瘤发生中的作用机制。方法采用pCR-SSCp(单链构象多态性)检测p53基因突变,用流式细胞仪Facscan检测大肠癌细胞染色体倍性、凋亡率及其在细胞周期各相中的分布情况。结果大肠癌标本p53基因突变率为50%;其中突变组肿瘤细胞凋亡率(22.11%)明显低于未突变组细胞凋亡率(40.57%),(p<0.05);突变组异倍体细胞百分率(占76.9%)明显高于未突变组(占46.2%),(p<0.05);异倍体肿瘤细胞凋亡率为34.0%,二倍体肿瘤细胞凋亡率为40.7%,二者差异无显著性(p>0.05)。结论p53基因突变使肿瘤细胞凋亡率下降,进而促进肿瘤发生、发展。p53基因突变多见于异倍体细胞,细胞凋亡率与细胞倍性无关。

Relationshipbetweenp53genemutationofcolorectalcancercell,apoptosisandcellploidy

OUQishui,SHENZhongyi,LUpeihua,etal.

(ShanghaiInstituteofImmunology,ShanghaiSecondMedicalUniversity,Shanghai200025)

【Abstract】ObjectiveTostudytherelationshipamongp53genemutation,apoptosisandcellploidyandexploretherolethatmutatedp53geneplaysinthetumorigenesis.Methodsp53genemutationsweredetectedbypCR-SSCp(singlestrandconformationpolymorphism).Cellploidy,therateofapoptosisoftumorcellsandcelldistributionineachcellphaseweredetectedbyflowcytometry.ResultsThep53genemutationrateofcolorectalcancerwas50%.Therateofapoptosisoftumorcellshavingmutationofp53gene(22.11%)wasmuchlowerthanthathavingnop53mutation(40.57%,p<0.05).Heteroploidcellshadbeenfoundin10/13tumorsampleswithp53genemutationand6/13sampleswithoutp53mutation(p<0.05).Therateofapoptosishadnodifferencebetweentheheteroploidcasesanddiploidcases.ConclusionMutationofp53genedecreasestheapoptosisrateofcolorectalcancercellsandpromotetumorigenesis.Cellploidyhadalinkwithp53genemutation,butnolinkwithcellapoptosis.

【Keywords】p53ApoptosisCellploidyGenemutation

我们对p53基因突变与大肠癌发生发展的关系,尤其是p53基因与新鲜大肠癌细胞凋亡的关系进行研究,现将结果报道如下。

材料与方法

1.标本来源39例标本均由上海瑞金医院外科提供,其中正常对照组9例(包括癌旁正常组织7例,正常人外周血淋巴细胞2例);大肠腺瘤4例;大肠癌标本26例,其中未转移组(Duke'sA/B期)17例,转移组(Duke'sC/D期)9例。其中女性23例,男性16例,年龄24~88岁。

2.标本处理取2cm×2cm大小的新鲜肿瘤块,用胶原酶消化法收集肿瘤细胞。将细胞分成二部分,一部分细胞按常规方法抽提DNA并配制终浓度为0.1μg/L的应用液于-20℃保存,另取至少3×105个细胞留作下述处理。正常人外周血淋巴细胞用Ficoll分离得到。正常大肠粘膜对照取自远离癌组织的大肠。

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