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M1-GSRNA靶向作用于K562细胞的研究

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日期:2006-11-19 来源:景天阁·健康资讯
内容提示:552-555为了探讨带有导引序列的核糖核酸酶P亚单位M1RNA(M1-GSRNA)转染白血病细胞株K562细胞后对bcr-abl融合基因mRNA及其表达产物的作用效应,复旦大学学者以X-tremeQ2介导转染K562细胞,设置空载体组作为对照,分别在转染后24,...

2005年03月02日中华血液学杂志2004Vol.25No.9p.552-555 为了探讨带有导引序列的核糖核酸酶p亚单位M1RNA(M1-GSRNA)转染白血病细胞株K562细胞后对bcr-abl融合基因mRNA及其表达产物的作用效应,复旦大学学者以X-tremeQ2介导转染K562细胞,设置空载体组作为对照,分别在转染后24,48,72和96h收集细胞,抽提总RNA,检测转染后不同时间bcr-ablmRNA的变化;在转染后48和96h,抽提总蛋白质,通过Westernblot检测癌基因的表达产物p210在不同时间的变化。利用半固体琼脂培养方法观察pAVGS4对K562细胞集落形成的影响。pAVGS4转染K562细胞后24,48,72和96hRT-pCR结果显示转染后24h,随时间的推移,实验组细胞内bcr-ablmRNA含量下降近1个对数级,72和96h实验组细胞内bcr-ablmRNA的含量接近,而对照组无明显改变。

Westernblot结果显示,实验组在48h的灰度值是同期对照组的10.4%,96h时为6.7%。K562细胞集落形成分析显示96h后集落抑制率达81.3%。该研究表明M1-GSRNA可以有效、特异地破坏bcr-ablmRNA,显著下调p210的表达,抑制K562集落形成。

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