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梅毒的实验室检查方法

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日期:2007-5-13 来源:景天阁·健康资讯
内容提示:以往的实验室检查有梅毒螺旋体检查,梅毒血清试验和脑脊液检查。随着基因诊断技术的发展,PCR技术应用检测梅毒螺旋体DNA,使梅毒的诊断变得准确、快速、敏感。一、梅毒螺旋体检查(一)检查方法1.暗视野显微镜检查:在皮损处,用玻片刮取组织渗出液或淋巴结穿刺液,见有活动的梅毒螺旋体。2.免疫荧光染色:在荧光显微镜..

以往的实验室检查有梅毒螺旋体检查,梅毒血清试验和脑脊液检查。随着基因诊断技术的发展,pCR技术应用检测梅毒螺旋体DNA,使梅毒的诊断变得准确、快速、敏感。

一、梅毒螺旋体检查
(一)检查方法
1.暗视野显微镜检查:在皮损处,用玻片刮取组织渗出液或淋巴结穿刺液,见有活动的梅毒螺旋体。
2.免疫荧光染色:在荧光显微镜下可见绿色的梅毒螺旋体。
3.活体组织检查梅毒螺旋体,如用银染色法(Warthin-starry)法或(Levoaditis法)或荧光抗体染色,可查见梅毒螺旋体,呈黑褐色,有螺旋结构,位于真皮毛细血管周围。银染色的阳性结果需谨慎解释,因为类似梅毒螺旋体的其他物质易混淆。而特异性荧光检查则更为可靠。

(二)螺旋体的鉴别
镜下检查梅毒螺旋体与雅司、地方性梅毒、品他三种非性病性螺旋体鉴别,此外还应与齿大螺旋体、齿小螺旋体、软螺旋体、生殖器螺旋体相鉴别。
1.雅司、地方性梅毒、品他三种非性病螺旋体:形态上不能与梅毒螺旋体相区别,但流行病学、病史、临床表现可以鉴别;
2.齿大螺旋体:为疏螺旋体,比梅毒螺旋体长,存在于口腔中,尤其在齿缝内最多;
3.齿小螺旋体:比梅毒螺旋体短,旋距也短,运动不规则,两端较中部略宽。主要见于齿垢中;
4.软螺旋体:为疏螺旋体,螺旋较少,运动不规律且快,常不断改变其形态。寄生于皮肤溃疡中。
5.生殖器螺旋体:比梅毒螺旋体短小,螺旋体大而不规则,生于阴垢内,不经常清洗者检出率较高。
6.其他:与螺旋形网状纤维、纤维蛋白细丝、纤毛、串状红细胞等呈螺旋状的物体相鉴别。

二、梅毒血清试验
根据所用抗原不同,梅毒血清试验分为以下两大类:
(一)非梅毒螺旋体抗原血清试验,用心磷脂作抗原,测定血清中抗心磷脂抗体,亦称反应素。本试验敏感性高而特异性较低,且易发生生物学假阳性。早期梅毒患者经充分治疗后,反应素可以消失,早期未经治疗者到晚期,部分病人中反应素也可以减少或消失。目前一般作为筛选和定量试验,观察疗效,复发及再感染。
1.性病研究实验室试验(VenerealDiseaseResearchLaboratorytest,VDRL);用心磷脂、卵磷脂及胆固醇为抗原,可作定量及定性试验,试剂及对照血清已标准化,费用低。此法常用,操作简单,需用显微镜读取结果,缺点是一期梅毒敏感性不高。
2.快速血浆反应素试验(Rapidplasmareagintest,RpR):是VDRL抗原的改良,敏感性及特异性与VDRL相似,优点是肉眼即可读出结果。
3.不加热血清反应素玻片试验(UnheatedSerumReaginUSR)也是VDRL抗原的改良,敏感性及特异性与VDRL相似。
(二)梅毒螺旋体抗原血清试验:用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原测定抗螺旋体抗体。这种试验敏感性和特异性均高,一般用作证实试验。这种试验是检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体,即使患者经过足够治疗,仍能长期存在,甚至终身不消失,血清反应仍持续存在阳性,因此,不能用于观察疗效。
1.荧光梅毒螺旋抗体吸收试验(FTA-ABSTest):此法是较敏感和较特异的螺旋体试验。
2.梅毒螺旋体血凝试验(TpHA):敏感性和特异性均高,操作简便,但对一期梅毒不如FTA-ABS试验敏感。
3.梅毒螺旋体制动试验(Treponemapallidumimmobilization,TpI);用Nichol株螺旋体(活的)加病人血清(含抗体)后,在补体的参与下可抑制螺旋体的活动。如≥50%梅毒螺旋体停止活动,则为阳性。此试验特异性、敏感性均高,但设备要求高,操作难,仅供研究用。

三、基因诊断技术检测梅毒螺旋体
梅毒螺旋体不能进行体外培养。检测临床标本中梅毒螺旋体最敏感、可靠的方法是兔感染试验(RIT),RIT能证实活的梅毒螺旋体存在,是检测梅毒螺旋体常用的标准方法。然而用RIT对新生儿或成人梅毒进行常规诊断不切合实际。梅毒的血清学诊断对确定感染及治疗很有意义,但对早期梅毒诊断不敏感,对先天性及神经性梅毒的诊断不够特异。血清学试验用作先天性梅毒的辅助诊断,其首要问题是将无症状感染婴儿从非感染婴儿区别开来,这些婴儿的母亲梅毒血清试验阳性,困难在于不能将母亲体液免疫反应同婴儿的抗体反应相区别,因为母亲的IgG可传递给胎儿。另外由于IgG终身存在,所以很难评价治疗结果。血清学诊断常常又存在着假阳性。
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